目的
建立并比较3 种急性肾脏病(AKD)动物模型,为研究AKD 病理生理机制提供基础研究证据。
方法
选取6~8 周健康雄性C57BL/6J 小鼠90 只,按照建立3 种AKD 模型,各分为模型组和对照组(15 只/组):叶酸模型组(给予0.5%叶酸250 mg/kg 腹腔注射)、叶酸对照组(等量0.3 M 碳酸氢钠腹腔注射);单侧输尿管梗阻(UUO)模型组(行单侧输尿管结扎)、UUO 对照组(仅游离输尿管);单侧缺血再灌注(UIR)模型组(钳夹单侧肾蒂30 min)、UIR 对照组(仅游离单侧肾蒂)。建模后2 d、8 d 和14 d 分别取材,检测血清肌酐、血尿素氮、蛋白尿水平,观测肾组织病理并评估肾损伤及胶原沉积。 Western 印迹检测纤维化相关的波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达;RT-qPCR 检测肾组织的肾损伤分子(KIM-1)及炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-8、IFN-γ)mRNA 表达。
结果
叶酸模型组在建模后8 d 时血清肌酐和血尿素氮明显升高(P 均<0.05),在建模后2 d 时KIM-1 表达高于其他两个模型组。 UUO 模型组在建模后8 d 时KIM-1 表达则高于其他两个模型组(P 均<0.05)。 3 个模型组的肾小管损伤分数和胶原沉积呈现时间依赖性增多,且均多于各自对照组。 在建模后14 d 时,UUO 模型组肾小管损伤分数、胶原沉积、波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达均高于另外两个模型组(P 均<0.05)。 在建模后8 d 时,3 个模型组的IL-8、IL-1β、TNF-α 和IFN-γ mRNA 表达均高于其对照组(P 均<0.05),而UUO 模型组的这些炎症因子表达高于另外两个模型组(P<0.05)。
结论
小鼠AKD 的叶酸模型、UUO 模型和UIR 模型均在建模操作后8 d 建成,其中UUO 模型在疾病进展中的肾纤维化更为严重。